12/03/12
2.3.1 ETAPAS DEL CULTIVO DE TEJIDOS
El cultivo de tejidos vegetales
es el proceso que se inicia con un explanto y termina con la obtención de
plantas completas, lo que involucra una serie de etapas, las cuales se enumeran
a continuación:
Elección de la planta y/o tejido
donante de explantos. En esta fase se incluyen los tratamientos, preparación y
selección de las plantas madre a partir de las cuales se inicia el cultivo,
siendo imprescindible comprobar la identidad (especie, variedad o cultivar) y
su estado de salubridad (libre de patógenos, deficiencias o estrés).
Establecimiento: consiste en la
desinfección de los explantos (generalmente con hipoclorito de sodio) y su
posterior adaptación al medio artificial de modo de inducir callo, brote, raíz
o embrión somático, según se desee. Se requiere desinfectar superficialmente el
material escogido para evitar que en el medio de cultivo crezcan
microorganismos, principalmente bacterias y hongos, que competirán
ventajosamente con el explanto
Multiplicación: consiste en
generar una cantidad de masa vegetal suficiente para la regeneración del número
de plantas necesarias.
Enraizamiento: es el proceso de
inducción de la formación de raíces con el fin de convertir alos brotes o
embriones somáticos en plántulas completas. El enraizamiento puede realizarse
tanto en condiciones in vitro como ex vitro. En el primer caso se transfieren
los brotes obtenidos en la etapa anterior a un medio libre de reguladores de
crecimiento o que sólo contenga auxinas. Esta operación se realiza en
condiciones de esterilidad (en cabina de flujo). En el segundo caso los brotes
se sumergen en una solución concentrada de auxinas y se transfieren a un
sustrato limpio, no necesariamente estéril, que puede ser una mezcla de turba
con perlita o vermiculita. Los brotes que se utilicen en el enraizamiento ex
vitro deben ser vigorosos y poseer hojas bien desarrolladas, ya que las plantas
deben realizar la fotosíntesis para obtener la energía necesaria para
desarrollarse y formar las raíces.
Rusticación: es el paso de
aclimatación de las plántulas obtenidas in vitro a las condiciones del ambiente
usuales fuera del tubo o frasco, es decir al suelo o algún sustrato inerte.
El enraizamiento ex vitro permite que la fase de
enraizamiento y la fase de aclimatación se logren simultáneamente y que
raramente se forme callo en la base de los explantos, asegurando así una
conexión vascular, continua entre el vástago y la raíz.
literatura citada
http://es.wikipedia.org/wiki/Cultivo_de_tejidos_vegetales
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